Η χρωματογραφία είναι μια διαδικασία που χρησιμοποιείται στην επιστήμη για τον διαχωρισμό μιγμάτων. Η βασική αρχή της χρωματογραφίας είναι ότι διαφορετικές ενώσεις διαφορετικών μεγεθών θα περάσουν από φράγματα με διαφορετικές ταχύτητες. Στην υγρή χρωματογραφία υψηλής πίεσης (HPLC), η ένωση εγχέεται μέσω στήλης σφαιριδίων διαφορετικού μεγέθους. Μια μικρότερη ένωση περνάει μέσα από τη στήλη ταχύτερα από μια μεγαλύτερη ένωση. Ο χρόνος που χρειάζεται για να περάσει η ένωση μέσω της στήλης είναι ο χρόνος κατακράτησης (RT). Ο σχετικός χρόνος κατακράτησης (RRT) είναι η σύγκριση της RT μιας ένωσης με την άλλη.
Εντοπίστε την κύρια αιχμή στην έξοδο HPLC. Η κύρια αιχμή θα είναι η μεγαλύτερη και πιο σημαντική κορυφή της παραγωγής.
Διαβάστε το RT της κύριας κορυφής. Αυτό μπορεί να διαβαστεί εξετάζοντας πότε ξεκινά η κορυφή και πότε σταματά. Εάν η κορυφή ξεκινά στα 6,5 λεπτά και τελειώνει στα 9,5 λεπτά, τότε το RT είναι 3 λεπτά.
Εντοπίστε την κορυφή ενδιαφέροντος. Αυτό μπορεί να είναι οποιαδήποτε κορυφή θέλετε να υπολογίσετε το RRT. Διαβάστε το RT αυτής της κορυφής. Εάν η κορυφή αρχίζει σε 1 λεπτό και τελειώνει στα 2,5 λεπτά, τότε η RT είναι 1,5 λεπτά.
Χωρίστε την RT της κορυφής ενδιαφέροντος από το RT της κύριας κορυφής για να βρείτε το RRT της κορυφής ενδιαφέροντος. Στην περίπτωσή μας, αυτό θα ήταν 1,5 λεπτά / 3 λεπτά, ή 0,5.