Περιεχόμενο
- HPLC και παρόμοιες τεχνικές
- Ταχύτητα, αποτελεσματικότητα και ακρίβεια
- Κόστος και πολυπλοκότητα
- Ευαισθησία και Ανάλυση
Η HPLC προσφέρει μια γρήγορη, αυτοματοποιημένη και εξαιρετικά ακριβή μέθοδο για τον προσδιορισμό ορισμένων χημικών συστατικών σε ένα δείγμα, αλλά μπορεί να είναι δαπανηρή, πολύπλοκη και δεν λειτουργεί για όλα τα δείγματα. Τα ιατρικά, ιατροδικαστικά, περιβαλλοντικά και κατασκευαστικά εργαστήρια χρησιμοποιούν την τεχνική για τον ποσοτικό προσδιορισμό και τον διαχωρισμό των χημικών σε ένα δείγμα. Η HPLC έχει πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα σε σύγκριση με άλλες τεχνικές.
HPLC και παρόμοιες τεχνικές
Όπως και άλλες μορφές χρωματογραφίας, η HPLC επιτρέπει τον διαχωρισμό των χημικών συστατικών μέσω της χρήσης κινητής φάσης και σταθερής φάσης. Η κινητή φάση είναι υγρή και η στατική φάση είναι στερεή. Επειδή τα διάφορα εξαρτήματα κινούνται με διαφορετικές ταχύτητες, διαχωρίζονται το ένα από το άλλο. Οι εναλλακτικές τεχνικές περιλαμβάνουν την τριχοειδή ηλεκτροφόρηση, όπου οι ουσίες μεταναστεύουν μέσω διαλυμάτων σε ένα ηλεκτρικό πεδίο και άλλες χρωματογραφικές μεθόδους όπως η εκχύλιση σε στερεή φάση, η αέρια χρωματογραφία και η χρωματογραφία λεπτής στιβάδας.
Ταχύτητα, αποτελεσματικότητα και ακρίβεια
Σε σύγκριση με άλλες τεχνικές χρωματογραφίας, όπως η TLC, η HPLC είναι εξαιρετικά γρήγορη και αποδοτική. Χρησιμοποιεί αντλία, αντί για βαρύτητα, για να πιέσει έναν υγρό διαλύτη μέσω ενός στερεού προσροφητικού υλικού, με διαφορετικά χημικά συστατικά να διαχωρίζονται καθώς κινούνται με διαφορετικές ταχύτητες. Η διαδικασία μπορεί να ολοκληρωθεί σε περίπου 10 έως 30 λεπτά και προσφέρει υψηλή ανάλυση. Είναι ακριβές και εξαιρετικά αναπαραγώγιμο. Επειδή είναι σε μεγάλο βαθμό αυτοματοποιημένη, οι βασικές διαδικασίες HPLC μπορούν να εκτελεστούν με ελάχιστη εκπαίδευση.
Κόστος και πολυπλοκότητα
Παρά τα πλεονεκτήματά της, η HPLC μπορεί να είναι δαπανηρή, απαιτώντας μεγάλες ποσότητες δαπανηρών οργανικών ουσιών. Τεχνικές όπως η εκχύλιση στερεάς φάσης και η τριχοειδής ηλεκτροφόρηση μπορεί να είναι φθηνότερες και ακόμη πιο γρήγορα, ειδικά για ανάλυση σύμφωνα με την ορθή παρασκευαστική πρακτική. Αν και είναι σχετικά εύκολο να χρησιμοποιηθούν οι υπάρχουσες μέθοδοι HPLC, μπορεί να είναι περίπλοκο για την αντιμετώπιση προβλημάτων ή την ανάπτυξη νέων μεθόδων. Αυτό οφείλεται σε μεγάλο βαθμό στη σειρά διαφορετικών ενοτήτων, στηλών και κινητών φάσεων.
Ευαισθησία και Ανάλυση
Γενικά, η HPLC είναι ευέλικτη και εξαιρετικά ακριβής όταν πρόκειται για τον εντοπισμό και την ποσοτικοποίηση χημικών συστατικών. Με πολλά βήματα που εμπλέκονται, η ακρίβεια της HPLC είναι σε μεγάλο βαθμό κάτω από τη διαδικασία που είναι αυτοματοποιημένη και ως εκ τούτου εξαιρετικά αναπαραγώγιμη. Η HPLC έχει χαμηλή ευαισθησία για ορισμένες ενώσεις και μερικές δεν μπορούν να ανιχνευθούν καθώς απορροφώνται μη αναστρέψιμα. Οι πτητικές ουσίες διαχωρίζονται καλύτερα με αέρια χρωματογραφία.