Περιεχόμενο
Το CFU αντιπροσωπεύει Μονάδες σχηματισμού αποικιών, έναν μικροβιολογικό όρο που χρησιμοποιείται για να ποσοτικοποιήσει πόσα βακτήρια υπάρχουν σε μια λύση. Ανάλογα με τη συγκέντρωση του δείγματος σας, πρέπει να εκτελέσετε πολλαπλές αραιώσεις και να τοποθετήσετε τα διαφορετικά δείγματα σε τρυβλία Petri. Εάν έχετε πάρα πολλές βακτηριακές αποικίες, είναι δύσκολο να μετρηθούν και αν υπάρχουν πολύ λίγες, το δείγμα μπορεί να μην είναι αντιπροσωπευτικό. Είναι γενικά καλή ιδέα να τοποθετήσετε το αρχικό διάλυμα σε πλάκα, έπειτα μια αραίωση 1/10 (1 μέρος διαλύματος, 9 μέρη φυσιολογικού ορού), αραίωση 1/100 και ενδεχομένως αραίωση 1/1000.
Υπολογισμός CFU από βακτηριακή αραίωση
Εκτελέστε μια προκαταρκτική μέτρηση κάθε πιάτου μόλις επωάσουν τα βακτήρια, η οποία συνήθως διαρκεί μία ή δύο ημέρες. Μετρήστε μόνο μεμονωμένες αποικίες, οι οποίες θα πρέπει να είναι ξεχωριστές, απομονωμένες κουκίδες, όχι ολόκληρη μια κηλίδα διαφορετικών αποικιών που αναπτύσσονται μαζί. Επιλέξτε την πλάκα που έχει περισσότερες από 30 από αυτές τις αποικίες αλλά μικρότερη από 300.
Μετράτε τον αριθμό των μεμονωμένων αποικιών. Αυτός είναι ο αριθμός CFU της αραίωσης σας - θα πρέπει να εκτελέσετε έναν απλό υπολογισμό για να προσδιορίσετε την CFU του αρχικού δείγματος. Για αυτό το παράδειγμα, χρησιμοποιήστε μια υποθετική πλάκα που περιέχει 46 αποικίες.
Προσδιορίστε το μέγεθος της αραίωσης που χρησιμοποιήσατε. (Στην ιδανική περίπτωση, σημειώσατε τα τρυβλία Petri μπροστά από το χρόνο). Για αυτό το παράδειγμα, αναμείξτε 1 mL βακτηριακής καλλιέργειας με 99 mL αλατούχου διαλύματος. Πρόκειται για αραίωση 1/100.
Πολλαπλασιάστε τον βαθμό της αραίωσης με το ποσό που πραγματικά πλαστικοποιήθηκε. Εάν τοποθετήσατε 0,1 ml της αραίωσης 1/100 στο άγαρ, πολλαπλασιάζετε 0,1 x 1/100, με αποτέλεσμα το 1/1000 ή το 0,001.
Διαχωρίστε την CFU της αραίωσης (τον αριθμό των αποικιών που μετρήσατε) με το αποτέλεσμα από το βήμα 4. Για αυτό το παράδειγμα, επεξεργάζεστε 46 ÷ 1/1000, το οποίο είναι ίδιο με 46 x 1.000. Το αποτέλεσμα είναι 46.000 CFU στο αρχικό δείγμα.