Πώς να υπολογίσετε την συγκέντρωση κυττάρων

Posted on
Συγγραφέας: John Stephens
Ημερομηνία Δημιουργίας: 25 Ιανουάριος 2021
Ημερομηνία Ενημέρωσης: 20 Νοέμβριος 2024
Anonim
Συγκέντρωση Διαλυμάτων
Βίντεο: Συγκέντρωση Διαλυμάτων

Οι επιστήμονες και οι τεχνικοί πρέπει συχνά να υπολογίζουν τη συγκέντρωση των κυττάρων σε εναιώρημα. Για παράδειγμα, όταν ένας ασθενής παίρνει το αίμα του στο ιατρείο, το εργαστήριο μπορεί να χρησιμοποιήσει ορισμένες μεθόδους για να αναζητήσει την ποσότητα των λευκών αιμοσφαιρίων σε έναν δεδομένο όγκο αίματος. Αυτό δίνει στον γιατρό πολλές πληροφορίες σχετικά με την υγεία σχετικά με τον ασθενή της, ιδιαίτερα το ανοσοποιητικό του σύστημα και αν καταπολεμά μια λοίμωξη ή άλλη ασθένεια. Δοκιμές όπως αυτό μπορούν να αναζητήσουν πολλά άλλα κύτταρα στο αίμα, καθώς και το νωτιαίο υγρό και άλλα σωματικά υγρά, όπως ο αριθμός των σπερματοζωαρίων στο σπέρμα για λόγους γονιμότητας. Οι επιστήμονες υπολογίζουν επίσης τις κυτταρικές συγκεντρώσεις βακτηριδίων, ζυμών και άλλων μικροοργανισμών για πολλούς σκοπούς που κυμαίνονται από την οικολογική έρευνα έως τις βιομηχανικές τεχνολογίες. Μια από τις πιο κοινές τεχνικές διδάσκεται επίσης σε πολλές τάξεις βιολογίας κολλεγίων και χρησιμοποιεί μια συσκευή που ονομάζεται θάλαμος μέτρησης.


    Πριν το κυτταρικό εναιώρημα μπορεί να εισέλθει στον θάλαμο μέτρησης, μπορεί να χρειαστεί αραίωση επειδή μπορεί να περιέχει χιλιάδες ή εκατομμύρια κύτταρα. Στην περίπτωση αυτή, τα κύτταρα δεν μπορούν λογικά να μετρηθούν. Για να αραιωθεί το δείγμα, χρησιμοποιήστε μια αποστειρωμένη πιπέτα για να τοποθετήσετε δέκα μικρολίτρα του κυτταρικού διαλύματος σε δοκιμαστικό σωλήνα που περιέχει 90 μικρολίτρα αραιωτικού. Ο τύπος του αραιωτικού θα εξαρτηθεί από τον τύπο του κυττάρου. Ανακατέψτε καλά. Το διάλυμα αυτό είναι τώρα δέκα φορές πιο αραιωμένο από το αρχικό δείγμα, οπότε ο συντελεστής αραίωσης είναι 10-1. Ετικέτα αυτό. Επαναλάβετε αυτό αρκετές φορές, χρησιμοποιώντας μια αποστειρωμένη πιπέτα κάθε φορά, έως ότου η λύση αραιωθεί αρκετά. Αν το αραιώσατε δεύτερη φορά, ο δεύτερος δοκιμαστικός σωλήνας ήταν 100 φορές πιο αραιωμένος από το αρχικό διάλυμα, οπότε ο συντελεστής αραίωσης ήταν 10-2 και ούτω καθεξής.

    Μπορεί να χρειαστεί να δοκιμάσετε αρκετές αραιώσεις για να προσδιορίσετε τον σωστό παράγοντα αραίωσης για τον θάλαμο μέτρησης. Ο θάλαμος μέτρησης είναι βασικά ένα πολύ μικρό, διαυγές, ορθογώνιο κιβώτιο με ακριβές βάθος και ακριβές πλέγμα γραμμένο στην κορυφή. Είναι επίσης γνωστό ως αιμοκυτταρόμετρο, ή μερικές φορές αιματοκυτόμετρο. Ο στόχος είναι να αραιωθεί αρκετά το εναιώρημα ώστε όταν παρατηρείται στον θάλαμο μέτρησης, κανένα κύτταρο δεν επικαλύπτεται και κατανέμεται σε όλο το δίκτυο με ομοιόμορφο τρόπο. Ρίξτε με σιφώνιο το αραιωμένο εναιώρημα που περιέχει τα κύτταρα μέσα στο φρεάτιο στο θάλαμο μέτρησης, όπου θα εγκατασταθεί μέσα στο θάλαμο του πλέγματος μέσω τριχοειδούς δράσης. Τοποθετήστε τον θάλαμο μέτρησης στη βαθμίδα του μικροσκοπίου και δείτε το με χαμηλή ισχύ.


    Το πλέγμα περιέχει τετράγωνα που είναι κατασκευασμένα από ακόμη μικρότερα τετράγωνα. Επιλέξτε περίπου τέσσερα ή πέντε τετράγωνα ή όσα πολλά χρειάζεστε για να μετρήσετε τουλάχιστον 100 κελιά, με ένα μοτίβο της επιλογής σας, όπως οι τέσσερις γωνίες και μια κεντρική πλατεία. Εάν τα κελιά είναι μεγάλα, αυτά θα μπορούσαν να είναι τα μεγάλα τετράγωνα, αλλά αν τα κελιά είναι μικρά, μπορείτε να επιλέξετε τα μικρότερα τετράγωνα.

    Ο συγκεκριμένος όγκος κάθε τετραγώνου πλέγματος μπορεί να διαφέρει από τον κατασκευαστή του θαλάμου μέτρησης, αλλά συχνά το βάθος του θαλάμου είναι 0,1 χιλιοστόμετρα, η περιοχή των μεγάλων τετραγώνων είναι 1 τετραγωνικό χιλιοστό και η περιοχή των μικρότερων τετραγώνων είναι 0,04 τετραγωνικά χιλιοστά. Τα μεγαλύτερα τετράγωνα, τότε, έχουν όγκο 0,1 κυβικά χιλιοστόμετρα. Για αυτό το παράδειγμα, υποθέστε ότι μετρήσατε συνολικά 103 κύτταρα σε πέντε τετράγωνα και ότι αραιώσατε το αρχικό δείγμα έως ότου ο συντελεστής αραίωσης ήταν 10-2.

    Εάν κάθε τετράγωνο πλέγματος έχει όγκο 0,1 κυβικών χιλιοστών και πέντε μετρήθηκαν, τότε ο συνολικός όγκος του θαλάμου που μετρήθηκε ήταν 0,5 κυβικά χιλιοστόμετρα και υπήρχαν 103 κύτταρα. Διπλασιάστηκε για να γίνει 1 κυβικό χιλιοστό θα το έκανε 206 κύτταρα. Ένα κυβικό εκατοστό ισοδυναμεί με 1 χιλιοστόλιτρο, πράγμα που αποτελεί χρήσιμη μέτρηση υγρών. Υπάρχουν 1.000 κυβικά χιλιοστά σε κυβικό εκατοστό. Επομένως, αν υπήρχε ένα κυβικό εκατοστόμετρο ή ένα χιλιοστόλιτρο ανάρτησης, θα υπολογίζατε 206.000 (206 x 1.000) κύτταρα. Αυτό είναι αυτό που μοιάζει με μια εξίσωση:


    Όγκος τετραγωνικού πλέγματος × αριθμός τετραγώνων που μετρήθηκε = ο συνολικός όγκος της αναλογίας μέτρησης

    Αριθμός κυττάρων ÷ όγκος μετρημένης αναρρόφησης = αριθμός κυττάρων ανά κυβικό χιλιοστόμετρο

    Αριθμός κυττάρων ανά κυβικό χιλιοστό × × 1000 = αριθμός κυττάρων ανά χιλιοστόλιτρο

    Θα χρειαστεί να λάβετε υπόψη κάθε αραίωση που έγινε για να καταστεί το αρχικό διάλυμα μετρήσιμο κάτω από το μικροσκόπιο. Σε αυτό το παράδειγμα, ο συντελεστής αραίωσης είναι 10-2. Για τον υπολογισμό της αρχικής συγκέντρωσης του διαλύματος:

    Καταμέτρηση κυττάρων ανά χιλιοστόλιτρο ÷ παράγοντα αραίωσης = συγκέντρωση κυττάρων

    Για αυτό το παράδειγμα, ο αριθμός των κυττάρων ανά χιλιοστόλιτρο είναι 206.000 και διαιρείται σε 10-2 (0,01) δίνει συγκέντρωση κυττάρων 20,600,000 κυττάρων ανά χιλιοστόλιτρο στο αρχικό δείγμα.